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03 功能富集与 Reactome 通路

差异蛋白列表本身只是中间产物。真正有用的是"这些蛋白对应哪些通路"。本章用 02 DEP 差异分析 的结果,走一遍 GO + Reactome + GSEA。

思路和 bulk RNA-seq 03 富集 完全一致,只是输入从基因换成了蛋白(通过 gene symbol 映射到 Entrez ID)。

真实示例

配套脚本 prot03_enrichment_sci.R 在 UbiLength 的 Ubi6 vs Ctrl 差异蛋白上跑 GO BP、Reactome、GSEA:

Rscript scripts/proteomics/prot03_enrichment_sci.R

每张图看什么

GO BP dotplot 图 1:GO biological process 富集 dotplot。泛素化相关通路(蛋白降解、泛素连接酶活性)排在最前面,符合实验设计。

Reactome pathway 图 2:Reactome 通路富集。Reactome 的通路粒度比 GO 更细,适合定位到具体的信号级联。

GO enrichment map 图 3:GO term 相似度网络。共享蛋白的 term 连在一起,帮助去冗余。

Up vs Down GO 图 4:分别对上调和下调蛋白做 GO 富集。上调蛋白富集在泛素化相关通路,下调蛋白富集在代谢或稳态维持通路。

GSEA waterfall 图 5:GSEA 瀑布图。不依赖阈值,直接看整条通路的蛋白是否整体偏向一个方向。

GSEA running-score 图 6:最强 NES 的 term 的 running-score 图。

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